苜蓿cDNA-AFLP反应体系的建立和优化

作者：蔡丽艳; 石凤翎; 李志勇; 高翠萍; 高飞翔

来源：种子, 2011, 30(8): 1-4,8.

DOI：10.3969/j.issn.1001-4705.2011.08.001

• 苜蓿
• cDNA-AFLP
• 叶片
• 体系优化

以改良的苜蓿雄性不育系叶片为材料,通过RNA提取、反转录、酶切、链接、PCR扩增、凝胶电泳等系列程序的摸索和优化,建立了适宜苜蓿cDNA-AFLP的反应体系,并得到了清晰可辨的cDNA-AFLP指纹图谱.结果如下:cDNA经EcoR Ⅰ和Mse Ⅰ完全酶切后,16℃连接15 h;20μl预扩增体系中加入连接产物2.0μl较适宜,预扩增产物稀释20倍后进行选择性扩增效果最佳.

• 单位
  中国农业科学院草原研究所; 内蒙古农业大学