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摘要
目的:研究双抗夹心酶联免疫ELISA法作为半夏及其炮制品中毒蛋白半夏凝集素蛋白(Pinellia ternata lectin, PTL)检查方法的可行性。方法:采用双抗夹心ELISA法，测定半夏不同炮制品中PTL含量。结果:方法学考察结果显示，非线性四参数曲线拟合相关系数r2=0.999 9,表明当PTL浓度在0.075～4.80 ng·mL-1浓度范围内，以非线性四参数拟合曲线计算PTL含量的准确度高，且方法精密度、稳定性、重复性较好。26批半夏生品及75批半夏炮制品(清半夏、法半夏、姜半夏各25批)中半夏中PTL含量均值为30.9 mg·g-1,其炮制品清半夏、法半夏、姜半夏中PTL含量均值分别为0.92 mg·g-1,48.80μg·g-1,130.32 ng·g-1,表明炮制后PTL含量显著下降，姜半夏中PTL含量最低，其次为法半夏，清半夏含量最高。同时建立半夏不同饮片中内源性毒性蛋白凝集素蛋白限度检查方法，建议清半夏、法半夏、姜半夏中PTL含量分别不超过2.70 mg·g-1、160.0μg·g-1、510.0 ng·g-1。结论:ELISA法测定半夏凝集素蛋白准确可靠，且成本低，可快速批量测定，可以作为半夏及其炮制品中PTL检查方法。
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单位南京中医药大学; 江苏省中医院; 中国食品药品检定研究院
