应用碱基猝灭探针法检测α-1抗胰蛋白酶基因342Glu→Lys突变

作者：秦莉; 张俊; 冯悦华; 罗光华

来源：临床检验杂志, 2013, (07): 527-530.

DOI：10.13602/j.cnki.jcls.2013.07.010

• 单核苷酸多态性
• α-1抗胰蛋白酶缺陷病
• PiZ等位基因突变 single nucleotide polymorphism
• alpha1-antitrypsin deficiency
• PiZ allele mutant

目的利用碱基猝灭探针技术建立检测编码α-1抗胰蛋白酶基因342Glu→Lys突变位点的新型诊断方法。方法探针3'端标记6-羧基荧光素,同时构建2个载体作为阳性对照模板,分别代表两种可能的纯合子基因型,即野生型和PiZZ纯合突变型。用熔解曲线对两种不同基因型结果进行分析判断,并验证检测方法的准确性和灵敏度。结果熔解曲线分析显示,338例患者标本均在50℃左右出现熔解谷,即所有标本均为野生型;Kappa检验结果显示,该法的检测结果与DNA测序法完全一致(k=1,P=0.000)。灵敏度分析结果显示,模板DNA量在103拷贝时可以看到明显的熔解谷。结论构建的方法准确、简单、经济,适合大规模对α-1抗...

• 单位
  苏州大学附属第三医院