人血白蛋白免疫优势抗原表位的筛选及鉴定

作者：李婷婷; 修冰水; 郭兴道; 张癸荣

来源：国际药学研究杂志, 2016, 43(05): 1002-1007.

DOI：10.13220/j.cnki.jipr.2016.05.038

• 人血白蛋白
• 免疫优势抗原表位
• 间接ELISA

目的筛选人血白蛋白(HSA)免疫优势抗原表位,为建立一种高特异性HSA制品快速检测方法提供基础。方法采用生物信息学方法比较人与其他物种(猪、马、牛、羊)白蛋白基因序列并预测其抗原表位,获得HSA免疫优势抗原表位;利用大肠杆菌优势密码子获得相应基因,插入PGEX-4T-2载体克隆表达得到重组HSA表位抗原;间接ELISA评价上述重组表位的特异性。结果筛选3个HSA抗原表位,分别位于H1〔126162氨基酸(aa)〕、H2(314355aa)、H3(373424aa),获得相应基因片段;得到重组抗原的相对分子质量(Mr)分别为3.01×104、3.06×104和3.17×104;抗原活性检测显示373424aa序列表位具有较高活性,其酶标抗体竞争抑制反应的IC50为1.635 mg/L,高于酶标HSA抗体。结论实验获得了特异性HSA免疫优势抗原表位,对研制一种快速、特异的HSA检测试剂具有重大意义。

• 单位
  河北北方学院; 中国人民解放军总后勤部卫生部药品仪器检验所; 军事医学科学院基础医学研究所