一种分离培养及鉴定小鼠牙龈间充质干细胞的方法

作者：陈丽玲; 徐振健; 徐安平^*

来源：新医学, 2022, 53(05): 349-354.

DOI：10.3969/j.issn.0253-9802.2022.05.010

• 牙龈间充质干细胞
• 提取培养
• 诱导分化
• 鉴定

目的 探讨建立一种新型、简便易行的小鼠牙龈间充质干细胞（GMSC）体外提取及培养方法。方法选择C57BL/6小鼠，使用Ⅳ型胶原酶消化分离其牙龈组织，种板培养并传代。利用细胞增殖及细胞毒性检测试剂盒（CCK-8法）观察小鼠GMSC的增殖规律，流式细胞术检测小鼠GMSC的细胞表面标志物，进行成脂、成骨诱导分化实验，观察所提取GMSC的多向分化潜能。结果 CCK-8试验显示小鼠GMSC在培养第3～4日增殖活跃（第2～5日相邻时间点间，P均<0.05），第5日开始增殖进入平台期（第5～8日的相邻时间点间比较，P均> 0.05）。流式细胞术结果显示，与小鼠口腔黏膜上皮细胞相比，GMSC高表达CD29、CD44、CD73、CD90和CD105(P均<0.05)，几乎不表达CD34、CD45(P均> 0.05)；多向分化诱导实验中，GMSC成功分化为对应的组织细胞，证实了GMSC的多向分化功能。结论 本研究成功提取小鼠GMSC，首次发现了一种新的、操作简便的、对原代细胞伤害少且有较高细胞获得率的科学提取GMSC方法，并鉴定了其细胞标志物和分化功能。

• 单位
  中山大学孙逸仙纪念医院