重组人EC-SOD包涵体的稀释复性及重折叠后蛋白的纯化

作者：朱希强; 袁勤生

来源：中国生物制品学杂志, 2005, (03): 252-255.

DOI：10.13200/j.cjb.2005.03.80.zhuxq.024

• 重组人EC-SOD
• 包涵体
• 稀释复性
• 纯化 Recombinant human EC-SOD
• Inclusion body
• Dilution renaturation
• Purification

目的确定重组人ECSOD包涵体体外稀释复性和复性后蛋白纯化的适宜方法。方法通过对pH、温度、包涵体蛋白浓度、尿素和精氨酸浓度及氧化还原对比率的定性定量分析,研究重组人ECSOD包涵体体外稀释复性的基本条件。采用金属离子亲和柱(IMAC)和肝素亲和柱(Heparinsepharose)对复性蛋白进行纯化,比较纯化效率的差异。结果最佳复性条件为pH8.5,尿素浓度为1.5molL,精氨酸浓度大于0.3molL,GSH∶GSSG=4∶1;复性温度及包涵体蛋白终浓度越高,复性效率越低。IMAC和Heparinsepharose亲和柱均可用来纯化复性蛋白溶液,但Heparinsepharose纯化效率较...