血清饥饿对大鼠椎间盘髓核细胞凋亡的影响及其机制研究

作者：吴瑞凯; 齐义营; 茹选良; 蒋增辉; 桂先革

来源：中华全科医学, 2016, 14(06): 889-892.

DOI：10.16766/j.cnki.issn.1674-4152.2016.06.003

• 血清饥饿
• 椎间盘髓核细胞
• 细胞凋亡
• 大鼠

目的研究血清饥饿对大鼠椎间盘髓核细胞凋亡的影响及其可能机制。方法培养大鼠原代腰椎间盘髓核细胞,取2代细胞进行实验,分为血清饥饿组和正常对照组。血清饥饿组培养基为DMEM,无血清培养24 h。正常对照组培养基为10%胎牛血清+DMEM,余培养条件同血清饥饿组。CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测细胞活性;脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(terminal deoxynucleotidyl transferase mediated d UTP nick end labeling,TUNEL)检测细胞凋亡;免疫细胞化学法检测p38MAPK、cleaved Caspase-3蛋白表达;RT-PCR(reverse transcription-PCR)检测Bcl-2 mRNA、Caspase-3 mRNA、p38MAPK mRNA的表达。结果血清饥饿组与对照组比较:1细胞活性明显下降(P<0.01);2凋亡率明显增高(P<0.01);3p38MAPK蛋白阳性表达明显增强,Caspase-3蛋白阳性表达明显增强;4Bcl-2 mRNA表达明显降低,Caspase-3 mRNA表达明显升高,p38MAPK mRNA表达明显升高(P<0.01)。结论血清饥饿培养可诱导大鼠腰椎间盘髓核细胞发生凋亡,其发生机制可能与p38MAPK通路下调Bcl-2,激活Caspase-3有关。

• 单位
  浙江大学医学院附属第二医院; 浙江医院