农杆菌介导的哈茨木霉T-DNA转化系统优化及拮抗能力突变子的性质分析

作者：黄亚丽; 蒋细良; 田云龙; 叶小波; 郭萍; 朱昌雄

来源：中国生物防治, 2009, (03): 233-238.

DOI：10.16409/j.cnki.2095-039x.2009.03.009

• 哈茨木霉
• 农杆菌
• T-DNA
• 遗传转化
• 拮抗突变子 Trichoderma harzianum
• Agrobacterium tumefaciens
• gentic transformation
• antagonistic mutants

采用单因子试验方法研究了农杆菌EHA105介导的哈茨木霉Th-33转化过程中,各主要因素对转化效率的影响,建立了高效的转化系统,使农杆菌转化哈茨木霉的效率达到60～150个转化子/10~6个木霉孢子,利用该转化系统构建了含有8000多个转化子的T-DNA插入突变库。通过转化子与立枯丝核菌的对峙试验,从1260株转化子中筛选到23株拮抗能力发生变化的突变子。随机挑选5株突变子对其遗传稳定性进行分析,表明5株突变子都具有稳定性,聚合酶链式反应(PCR)表明上述突变子均有T-DNA片段的插入。

• 单位
  植物病虫害生物学国家重点实验室; 中国农业科学院农业环境与可持续发展研究所; 中国农业科学院植物保护研究所; 河北省科学院生物研究所