猪Mx1基因及分段基因真核表达载体的构建和鉴定

作者：田云飞; 胡悦; 齐静; 吴香菊; 孙吉谦; 崔云前; 刘新利^*; 杜以军^*

来源：畜牧与兽医, 2019, 51(04): 65-69.

• Mx1基因
• 真核表达
• 抗病毒蛋白
• 蛋白分段
• 免疫印迹

试验旨在通过对猪Mx1基因及其分段基因的真核表达载体的构建和鉴定,为进一步研究Mx1基因的功能奠定基础。试验以猪Mx1的基因序列为基础,以真核表达质粒pXJ41为载体,依据Mx1的蛋白结构进行分段,添加了Flag标签,构建了Mx1及Mx1分段基因的真核表达质粒,分别命名为pXJ41-Flag-Mx1、pXJ41-Flag-G、pXJ41-Flag-GMD、pXJ41-Flag-MDL4、pXJ41-Flag-GED。然后通过免疫印迹试验检测上述质粒在HEK-293T细胞中的表达情况,通过间接免疫荧光试验鉴定目的蛋白在细胞内的定位情况。免疫印迹试验成功检测到了Mx1及Mx1分段基因的蛋白条带,间接免疫荧光试验检测到各目的蛋白定位于细胞质。上述真核表达质粒可在HEK-293T细胞中成功表达,Mx1及其分段真核表达质粒的构建和成功表达及定位对进一步探索Mx1的功能及机制奠定了基础。

• 单位
  齐鲁工业大学; 山东省农业科学院; 生物工程学院