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摘要
为了研究固体脂质纳米粒通过表面吸附抗原蛋白所发挥的免疫佐剂效应,试验用热融超声乳化法制备固体脂质纳米粒悬液(SLN1和SLN2),用激光纳米粒度仪对纳米粒进行了平均粒径(mean diameter, MD)、多分散性系数(polydispersity index, PDI)、表面电位(zeta potential, ZP)的检测。以BSA蛋白为标志抗原,将36只ICR雌性小鼠随机分为6组,即BSA溶液组(500μg/mL BSA溶液1 mL)、BSA-SLN1组(BSA-SLN1 950μL+10 mg/mL BSA 50μL)、BSA-SLN2组(BSA-SLN2 950μL+10 mg/mL BSA 50μL)、BSA-CFA组(1 mg/mL BSA溶液500μL+CFA 500μL)组、空白SLN组(不加BSA的SLN悬液1 mL)和生理盐水阴性对照组(灭菌生理盐水1 mL),各组小鼠通过腿部肌肉注射相应溶液100μL免疫,免疫后2,4,6周采血,采用间接ELISA法检测血清抗体效价。结果表明:制得的固体脂质纳米粒悬液外观呈乳白色、无味、无沉淀。光学显微镜观察大小比较均匀、分散性好。SLN1悬液的MD、PDI、ZP与SLN2悬液相比均差异显著(P<0.05)。BSA-SLN组抗体效价约为14 lb,显著高于BSA溶液组(10 lb,P<0.05),但显著低于BSA-CFA组(18 lb,P<0.05),而空白SLN组与阴性对照组检测结果都为阴性。第6周BSA溶液组抗体效价大幅降低,而BSA-SLN组与BSA-CFA组继续维持原有水平。比较不同粒径的纳米粒佐剂效应结果显示,SLN1[(237±2)nm]与SLN2[(95±5)nm]固体脂质纳米粒具有非常相似的佐剂作用,二者抗体效价无显著差异(P>0.05)。说明SLN能够通过吸附抗原蛋白显著地提高免疫反应,具有良好的佐剂作用。
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