阿维链霉菌孢子色素生物合成对阿维菌素产量的影响

作者：朱娟娟; 陶美凤

来源：生物工程学报, 2008, (10): 1702-1706.

DOI：10.13345/j.cjb.2008.10.011

• 孢子色素
• whiEa
• 阿维链霉菌
• 接合转移
• 基因置换
• 阿维菌素 spore pigment
• Streptomyces avermitilis
• conjugation
• gene replacement
• avermectins

以野生型阿维链霉菌NRRL8165为出发菌株,用PCR方法克隆孢子色素基因簇直系同源基因(whiEa)侧翼片段,并构建基因置换载体pHL643。将pHL643跨属接合转移进入阿维链霉菌NRRL8165,通过置换载体和染色体之间的同源双交换,对染色体上的whiEa基因簇进行置换,得到3株阿泊拉霉素抗性、硫链丝菌素敏感的重组菌株,均表现为孢子色素合成缺陷。通过Southern杂交分析,证明whiEa基因簇被置换。通过摇瓶发酵和HPLC检测,发现whiEa基因簇置换菌株所产阿维菌素产量明显提高,表明孢子色素与阿维菌素生物合成之间可能有竞争底物的现象。