DMDD与索拉非尼联合应用协同抑制肝癌细胞恶性生物学行为的实验研究

作者：农莹丹; 范氏泰和; 韩箫; **飞; 梁天仪; 卢春苗; 唐立博; 杨子叶; 韩创业; 罗小玲^*

来源：海南医学院学报, 2023, 29(13): 975-982.

DOI：10.13210/j.cnki.jhmu.20230519.001

• 肝细胞癌
• DMDD
• 索拉非尼
• 抑制作用
• 丝氨酸合成通路

目的：探讨中药杨桃根提取物DMDD单体（2-dodecyl-6-methoxycyclohexa-2,5-diene-1,4-dione与索拉非尼联合应用对人肝癌Huh7细胞恶性生物学行为的影响及可能的机制。方法：实验分4组：Huh7细胞对照组、DMDD组、索拉非尼组及DMDD与索拉非尼联合应用组（简称联合应用组）。CCK-8法检测Huh7细胞活力，以金氏公式判定协同效应；平板克隆实验检测Huh7细胞的集落形成能力；划痕实验、Transwell迁移实验和侵袭实验检测Huh7细胞的迁移能力和侵袭能力；流式细胞术检测Huh7细胞周期；RT-qPCR和Western blot检测丝氨酸合成通路中的PHGDH mRNA转录水平和蛋白表达水平。结果：平板克隆实验、划痕实验和Transwell迁移实验结果显示，与Huh7细胞对照组、DMDD组、索拉非尼组比较，DMDD和索拉非尼联合应用组对Huh7细胞增殖、迁移和侵袭能力的抑制作用显著增强（均P<0.05），经金氏公式计算，2、4、8μmol/L DMDD分别联合1、2、4μmol/L索拉非尼具有协同作用（Q>1.15）,6、10μmol/L DMDD分别联合3、5μmol/L索拉非尼具有相加作用（0.85<Q<1.15）；流式细胞周期检测显示，各组药物干预48 h后，对照组、DMDD组、索拉非尼组及联合应用组G2/M期细胞比例分别为（10.63±0.32）%、（35.77±1.22）%、（30.03±2.22）%、（38.97±0.60）%。与对照组比较，3个组的G2/M期细胞比例均显著上升（均P<0.000 1），与索拉非尼组比较，联合应用组G2/M期细胞比例显著上升（P<0.000 1）。RT-qPCR和Western blot结果显示，DMDD与索拉非尼联合应用可显著抑制PHGDH的mRNA转录水平和蛋白表达水平（P<0.05）。结论：DMDD与索拉非尼联合应用具有协同增效作用，可协同抑制Huh7细胞的增殖、侵袭和迁移能力，其机制与协同抑制丝氨酸合成通路中的PHGDH的基因转录和蛋白表达有关。

• 单位
  广西医科大学; 广西医科大学第一附属医院; 广西医科大学附属肿瘤医院; 基础医学院; 广西国际壮医医院