RNA干扰TRAP1表达抑制CD133+CD44+喉癌干细胞生长并促进凋亡

作者：薛海涛; 苏静; 陈帅; 陈春菊; 张继华; 田君海; 董凯峰

来源：中国组织工程研究, 2017, 21(17): 2672-2677.

• 肿瘤干细胞
• 喉肿瘤
• 肿瘤坏死因子受体相关肽和相关蛋白质类
• RNA干扰
• 组织工程
• 干细胞
• 喉鳞癌
• CD44
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• TRAP1
• 细胞凋亡
• 细胞增殖

背景:肿瘤坏死因子受体相关蛋白1(TRAP1)是线粒体特异性热休克蛋白90家族的同源基因。大量研究表明其过量表达与多种癌症的发生密切相关。但其在喉鳞癌发生中的作用及作用机制目前还不清楚。目的:探讨RNA干扰能否靶向抑制TRAP1过表达以及对人喉癌干细胞增殖和凋亡的作用效果。方法:采用免疫磁珠技术从人喉癌Hep-2细胞系中分选出CD133+CD44+喉癌干细胞。设计及合成TRAP1的sh RNA序列,LipofectamineTM 2000转染CD133+CD44+喉癌干细胞。CCK-8增殖实验、集落形成实验、流式细胞术检测干扰TRAP1基因表达对CD133+CD44+喉癌干细胞增殖和凋亡的影响,采用分光光度法检测细胞内caspase-3,caspase-8,caspase-9活性。结果与结论:(1)TRAP1 sh RNA转染的CD133+CD44+喉癌干细胞内TRAP1基因和蛋白表达明显下调(P<0.01);(2)与空白对照组和转染空质粒阴性对照组比较,TRAP1表达下调抑制了CD133+CD44+喉癌干细胞增殖和集落形成能力(P<0.05);(3)与空白对照组和转染空质粒阴性对照组比较,TRAP1表达下调增加CD133+CD44+喉癌干细胞凋亡率(P<0.05);(4)TRAP1 sh RNA介导细胞凋亡与caspase-3,caspase-8和caspase-9激活有关;(5)结果提示RNA干扰TRAP1表达可抑制CD133+CD44+喉癌干细胞生长并促进细胞凋亡。TRAP1可能为喉鳞癌治疗的基因靶点。

• 单位
  河北医科大学第一医院