人NSPc1慢病毒过表达系统的建立与鉴定

作者：李辉; 龚燕华; 胡光宇; 阴彬

来源：基础医学与临床, 2011, (04): 440-444.

DOI：10.16352/j.issn.1001-6325.2011.04.002

• 过表达
• NSPc1
• 慢病毒载体
• 多梳家族 over-expression
• lentivirus vector
• polycomb group

目的建立并鉴定人NSPc1慢病毒过表达系统,以便应用过表达技术进一步研究NSPc1功能。方法设计针对人NSPc1cDNA序列的带酶切位点引物,PCR扩增获得双链DNA后,与酶切后的pLenti6-TO-EGFP-TRIP载体片段进行连接、转化,酶切及DNA测序鉴定重组克隆。提取阳性克隆质粒,转染293T细胞并用Western blot检测质粒过表达效果。用293T细胞制备慢病毒颗粒,感染293T细胞后收集细胞全蛋白,用Western blot检测慢病毒系统过表达效果。结果证实人NSPc1正确插入慢病毒载体,人NSPc1慢病毒过表达质粒及相应病毒颗粒能有效过表达NSPc1。结论人NSPc1慢病毒...

• 单位
  中国人民武装警察部队后勤学院; 中国医学科学院基础医学研究所; 医学分子生物学国家重点实验室; 生物化学教研室