基于颜色判定的环介导恒温扩增法快速检测结核分枝杆菌

作者：尹志涛; 李娜; 袁静; 刘威; 邹大阳; 熊鸿燕; 黄留玉

来源：军事医学, 2013, (08): 619-623.

DOI：10.7644/j.issn.1674-9960.2013.08.014

• IS6110
• 环介导的恒温核酸扩增法(LAMP)
• 快速检测
• 结核分枝杆菌 IS6110
• loop-mediated isothermal amplification(LAMP)
• rapid diagnosis
• Mycobacterium tuberculosis

目的建立快速检测结核分枝杆菌环介导的恒温扩增法。方法针对结核分枝杆菌特异性保守靶序列IS6110,采用环介导的恒温扩增法(LAMP)引物设计原则设计6条引物,特异性识别靶基因序列上8个独立区域。LAMP反应过程中会产生焦磷酸镁白色沉淀,可以通过实时监测反应液浊度来判断反应结果。结果试验表明,在60～65℃恒温条件下,LAMP反应60 min内即可完成;如果在反应前添加钙黄绿素,可通过反应液颜色的变化来判断反应结果;LAMP方法的最低检出核酸浓度为101 pg/μl,其灵敏度是PCR方法最低检出浓度1.01 ng/μl的10倍,且具有良好的特异性。结论 LAMP方法检测结核分枝杆菌具有简单、快速...

• 单位
  军事医学科学院附属医院; 第三军医大学