糙皮侧耳HMG-box转录因子分析与候选基因克隆表达

作者：赵琛; 王翔; 闫舟; 郝金斌; 王芳^*; 刘靖宇^*

来源：食用菌学报, 2023, 30(06): 1-11.

DOI：10.16488/j.cnki.1005-9873.2023.06.001

• 糙皮侧耳
• HMG-box
• 基因克隆
• 原核表达

在糙皮侧耳(Pleurotus ostreatus)的全基因组中鉴定出14个高速泳动蛋白(high-mobility group box,HMG-box)的编码基因(PoHMG1～PoHMG14)，对其进行特征、结构与系统进化分析，发现所有的HMGbox转录因子蛋白的三级结构高度相似，相对分子质量为6893.79～60397.29，蛋白PoHMG6、PoHMG11、PoHMG12与PoHMG13之间的亲缘关系较近。基于糙皮侧耳在菌丝、原基、幼嫩子实体和成熟子实体时期的转录组数据，对筛选到的转录因子基因PoHMG11进行克隆分析并探究其功能及表达特性，发现该基因全长序列1 517 bp，编码489个氨基酸，含有一个HMG-box结构域。通过大肠杆菌原核表达载体体外诱导表达出相对分子质量为5.5×104的蛋白，该重组蛋白在1 mol·L-1 IPTG、25℃诱导表达6 h时表达量最高。利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析糙皮侧耳在菌丝、原基、幼嫩子实体和成熟子实体阶段PoHMG11基因的相对表达量，发现该基因在成熟糙皮侧耳子实体中的表达量比其他生长发育时期显著升高5倍以上，推测该基因可能参与调控糙皮侧耳子实体成熟过程。

• 单位
  山西农业大学; 中国科学院微生物研究所; 真菌学国家重点实验室