摘要
目的 探讨电针治疗对老年大鼠的关节软骨及软骨下骨极化相关蛋白表达的影响。方法 16只24月龄SD雄性大鼠随机分为老年组和电针组,每组8只;8只6月龄SD雄性大鼠为青年组。电针组接受电针治疗,穴取双侧“太溪”、“足三里”、“阳陵泉”、“血海”。电针参数:疏密波,疏波频率3 Hz,密波15 Hz,电流强度1 mA,1次/d,30 min/次,每周5 d,连续8周。其余两组用胶带固定无菌针,连接电针仪但不开机。8周后取材,ELISA法检测血清Ⅱ型胶原C端肽(CTX-Ⅱ)含量;显微CT(Micro-CT)检测左侧胫骨软骨下骨微结构;番红-固绿染色在光镜下观察左胫骨平台软骨组织形态结构,并采用改良Mankin′s评分评估关节软骨退变程度。RT-qPCR、Western blot检测基质金属蛋白酶-1(MMP-1),基质金属蛋白酶-3(MMP-3),基质金属蛋白酶-13(MMP-13),肿瘤坏死因子-α(TNF-α),白细胞介素-1β(IL-1β),巨噬细胞甘露糖受体(MMR),精氨酸酶1(Arg1)mRNA及蛋白表达水平。结果 (1)与青年组大鼠相比,老年组大鼠血液中CTX-Ⅱ含量增高(P <0.05);番红-固绿染色显示大鼠软骨表面结构破坏严重,软骨与软骨下骨分解不清,钙化严重,出现多重潮线,细胞数量明显减少,出现裂层,细胞形态结构异常,染色不均;改良Mankin′s评分增加(P <0.05);骨密度、骨体积分数、骨小梁数量均降低(P <0.05),骨小梁厚度,骨小梁间距均增大(P <0.05);MMP-1,MMP-3,MMP-13 mRNA及蛋白表达升高(P <0.05),TNF-α,IL-1β m RNA及蛋白表达升高(P <0.05),MMR,Arg1 mRNA及蛋白表达降低(P <0.05)。(2)与老年组大鼠相比,电针组大鼠的CTX-Ⅱ含量降低(P <0.05);番红-固绿染色显示大鼠软骨表面稍平整,未见明显裂层,软骨细胞数量较老年组有所增加,染色较均匀;改良Mankin′s评分降低(P <0.05);骨密度,骨体积分数,骨小梁数量均增加(P <0.05),骨小梁间距降低(P <0.05),骨小梁厚度有降低趋势(P> 0.05);MMP-1,MMP-3,MMP-13mRNA及蛋白表达降低(P <0.05),TNF-α,IL-1β mRNA及蛋白表达降低(P <0.05),MMR,Arg1 mRNA及蛋白升高(P <0.05)。结论 电针可能通过促进老年大鼠OA关节软骨及软骨下骨M2极化,缓解关节软骨降解及抑制软骨下骨骨质疏松,从而达到保护关节的作用。
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