蛋白酪氨酸激酶7和受体酪氨酸激酶样孤儿受体2在hSOD1-G93A突变肌萎缩侧索硬化症转基因小鼠脑干中的表达

作者：孟凡迪; 管英俊^*; 赵振涵; 陈燕春; 刘金梦; 王雪枚; 张皓云; 周风华

来源：解剖学报, 2022, 53(06): 689-697.

DOI：10.16098/j.issn.0529-1356.2022.06.001

• 肌萎缩侧索硬化症
• 脑干
• 蛋白酪氨酸激酶7
• 受体酪氨酸激酶样孤儿受体2
• 免疫荧光
• 转基因小鼠

目的 探讨脑干中蛋白酪氨酸激酶7(PTK7)和受体酪氨酸激酶样孤儿受体2(ROR2)的表达变化与肌萎缩侧索硬化症(ALS)发病的关系。方法 选取44只人超氧化物歧化酶1(hSOD1)-G93A突变型ALS转基因小鼠，以同等数量的同窝野生型小鼠作为对照，于出生后70 d、95 d、108 d和122 d分离脑干，尼氏染色法观察模型小鼠脑干舌下神经核(12N)及面神经核(7N)神经元形态变化，RT-PCR、Western blotting技术分别检测模型小鼠脑干中PTK7和ROR2 mRNA及蛋白表达变化，免疫荧光双标技术观察12N及7N中PTK7和ROR2的细胞定位及分布特点。结果 尼氏染色结果显示，ALS转基因小鼠脑干12N及7N可见神经元尼氏体明显减少，神经元空泡样变性，胞体萎缩，核体积变小。RT-PCR结果发现，与同窝野生型小鼠相比，ALS转基因小鼠脑干ROR2和PTK7 mRNA在70 d、95 d、108 d和122 d升高。Western blotting结果显示，与同窝野生型小鼠相比，ALS转基因小鼠脑干中PTK7在70 d、95 d、108 d和122 d表达升高，ROR2在70 d、95 d、108 d表达升高，122 d表达降低。免疫荧光结果显示，在ALS转基因小鼠和野生型小鼠脑干12N及7N均可检测到ROR2/神经元核抗原(NeuN)和PTK7/NeuN双阳性细胞，ROR2/胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和PTK7/GFAP双阳性细胞，提示ROR2和PTK7在神经元和星形胶质细胞中共表达。结论 PTK7和ROR2在ALS转基因小鼠脑干中表达异常与ALS发病密切相关。

• 单位
  潍坊医学院