摘要
目的探讨大鼠颞下颌关节髁突软骨细胞的培养方法,观察细胞的生物学特性。方法分离3只Wistar大鼠髁突软骨,采用Ⅱ型胶原酶消化法联合组织块法获取髁突软骨干细胞,采用MTT法检测细胞生长曲线,采用甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学法和Ⅱ型胶原免疫荧光法鉴定细胞来源。结果Ⅱ型胶原酶消化法联合组织块法消化髁突软骨组织1820h可获得最大量细胞;体外培养软骨细胞主要呈多角形,第14代细胞具有稳定生物学特性,5代及5代以后逐渐出现老化细胞;MTT检测结果显示第3代细胞可最快达指数生长期;髁突软骨细胞经甲苯胺蓝染色、Ⅱ型胶原免疫组织化学染色及免疫荧光染色鉴定,结果均为阳性表达,细胞来源于软骨。结论Ⅱ型胶原酶消化法联合组织块法可作为髁突软骨细胞获取方法;4代以内细胞具有稳定的生物学特性,可用于其他实验。
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单位新疆医科大学第一附属医院; 新疆医科大学第二附属医院