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摘要
为分析临床分离的52株猪源支气管败血波氏杆菌(Bb)在纸片扩散法(K-B)药敏试验中出现的庆大霉素(GEN)异质性耐药(HR)情况，本研究采用微量肉汤稀释法检测52株Bb分离株对GEN的最小抑菌浓度(MIC)；采用K-B法检测分离株对GEN的敏感性；通过观察抑菌环内是否有菌落初步筛选疑似GEN HR菌株；采用菌落谱性分析法(PAP)测定初筛菌株的MIC与最大不抑菌浓度(MNIC)的比值，以及耐药亚群菌株的发生频率，验证初筛的HR菌株。结果显示：52株猪源Bb对GEN耐药的菌株占13.46%(7/52)，多数分离株的MIC值为2μg/mL～8μg/m L，对GEN表现为敏感或中介，占全部菌株的86.54%(45/52)，其中Bb48株的MIC为2μg/mL，抑菌环直径为16 mm属于GEN敏感菌株。通过观察纸片法药敏试验中的抑菌环内是否存在菌落，初步筛选对GEN HR的菌株。结果显示，有7株疑似HR菌株；PAP试验结果显示，6株疑似HR菌株的MIC/MNIC比值均小于8，为假阳性HR菌株，只有Bb48株的MIC/MNIC值为16且耐药亚群发生频率为1.3×10-6，按照标准判定其为GEN HR Bb菌株。从PAP试验验证的Bb48株中有菌落生长的最高浓度GEN平板上随机挑3株耐药亚群菌株，37℃培养12 h，每小时测一次菌落数，共测12 h连同Bb48株一起绘制生长曲线；将上述试验选取的3株耐药亚群菌株连续传50代，每5代测其MIC值判定耐药亚群菌株的耐药遗传稳定性。生长曲线结果显示Bb48株及其耐药亚群菌株的生长速率均无显著差异(P>0.05)；耐药遗传稳定性试验结果显示，将Bb48株中的3株耐药亚群菌株传代，其中两株菌各代次的MIC均为32μg/mL,1株菌的MIC为8μg/mL～32μg/mL。表明耐药亚群菌株对GEN的耐药性能够有效遗传。上述结果表明，52株猪源Bb中的Bb48为GEN HR菌株，Bb48及其耐药亚群菌株的生长速率基本一致，且对GEN的耐药性能够稳定遗传。本研究首次得到了罕见的对GEN HR的Bb菌株，提示临床中应合理使用GEN，并监测HR菌株的出现，对临床使用GEN治疗猪源Bb感染具有重要指导意义。
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单位河南科技大学; 动物科技学院; 中国动物卫生与流行病学中心
