重组人源抗血管内皮生长因子单克隆抗体的制备及鉴定

作者:董雪; 徐雨昕; 郭晶; 龚忠阔; 夏霖亚; 殷玉和; 吴丛梅*
来源:吉林大学学报(理学版), 2019, 57(06): 1538-1543.
DOI:10.13413/j.cnki.jdxblxb.2018461

摘要

通过优化密码子获得带有信号肽的人源抗血管内皮生长因子(VEGF)抗体的重链和轻链DNA序列,分别构建表达载体pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV,将表达载体共转染HEK-293细胞后,与C6胶质瘤细胞共培养,并将所得蛋白进行分离纯化.实验结果表明:pcDNA-VEGFH和pcDNA-VEGFV共转染HEK-293F细胞,可显著抑制C6细胞增殖(P<0.01);转染24~144h后的细胞培养上清液中均有蛋白表达;所得纯化蛋白和标准品一致;纯化所得抗体蛋白能明显抑制C6细胞增殖(P<0.05~0.01),与标准品抑制效果相似.