基于金纳米颗粒标记非洲猪瘟病毒p30蛋白免疫层析检测方法的建立

作者：孙燕燕; 赵亚茹; 李昕; 杨吉飞; 牛庆丽; 林密; 王兆贵; 刘猛; 关贵全; 殷宏; 蒋韬^*; 刘志杰^*

来源：中国兽医科学, 2020, 50(08): 939-945.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0127

• 非洲猪瘟病毒
• p30蛋白
• 抗体检测
• 金纳米颗粒
• 免疫层析法

为建立一种用于非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的快速检测方法,本研究将特异性高、抗原性强的重组ASFV p30蛋白用金纳米颗粒标记,制成捕获金标抗原;将p30蛋白及其多克隆抗体(ASFV-p30-Ab)包被在硝酸纤维素膜(NC)上,分别作为检测线(T线)和质控线(C线),制备ASFV p30金纳米颗粒免疫层析抗体检测试纸条,并对该方法开展了初步评价。结果表明,该试纸条可在5-10 min完成检测;以健康猪血清、口蹄疫病毒(FMDV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)等阳性血清作为对照,该方法仅特异性的检出ASFV感染的血清阳性样品,与各对照组血清无交叉反应;以进口ASFV抗体ELISA检测试剂盒作为金标准对阴、阳性样品进行对比检验,该试纸条检出的敏感性和特异性分别为92.52%和92.00%,说明本研究制备的ASFV p30抗体金纳米颗粒检测试纸条具有较高的敏感性和特异性,具备操作简便、检测快速和结果判断容易等特点,具有ASF现场检测的实际应用价值。

• 单位
  中国农业科学院兰州兽医研究所; 江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心; 甘肃农业大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室