摘要

目的探讨布托啡诺对脂多糖(LPS)致心肌细胞炎症反应、细胞凋亡的影响及其对微小RNA-665(miR-665)的调控作用。方法 LPS处理心肌细胞建立细胞损伤模型,使用不同剂量的布托啡诺处理细胞,将anti-miR-NC、anti-miR-665分别转染至LPS诱导的心肌细胞,将miR-NC、miR-665 mimics分别转染至LPS诱导的心肌细胞后加入布托啡诺处理;采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测miR-665的表达量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测Bcl-2、Bax蛋白表达量。结果 LPS处理后可提高心肌细胞中TNF-α、IL-6水平、细胞凋亡率、Bax蛋白水平及miR-665的表达水平(P<0.05),降低Bcl-2蛋白水平(P<0.05);与LPS组比较,布托啡诺不同剂量组可明显降低TNF-α、IL-6水平、细胞凋亡率、Bax蛋白水平及miR-665的表达水平(P<0.05),提高Bcl-2蛋白水平(P<0.05);转染anti-miR-665对LPS诱导的心肌细胞炎症反应及凋亡的作用与布托啡诺相似;布托啡诺与转染miR-665 mimics共同处理后可明显提高TNF-α、IL-6水平、细胞凋亡率及Bax蛋白水平(P<0.001),降低Bcl-2蛋白水平(P<0.001)。结论布托啡诺可通过下调miR-665的表达而抑制LPS诱导的心肌细胞炎症反应及细胞凋亡,从而减轻心肌细胞损伤。