缺氧诱导因子1α小干扰RNA联合顺铂抑制人食管鳞癌TE-1细胞裸鼠移植瘤的生长

作者：廖洪映; 谷力加; 翁毅敏; 黄邵洪; 陈惠国; 李昀; 蔡松旺; **; 宋江平

来源：中华生物医学工程杂志, 2009, 15(5): 354-359.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2009.05.007

• RNA干扰
• 缺氧诱导因子1
• α亚基
• 顺铂
• 食管肿瘤
• 鳞癌

目的 探讨缺氧诱导因子1α(HIF-1α)小干扰RNA(siRNA)联合顺铂对人食管鳞癌TE-1细胞裸鼠移植瘤生长的影响.方法 体外培养人食管鳞癌TE-1细胞,接种于12只裸鼠右上肢外侧皮下,建立裸鼠荷瘤模型开始抑瘤实验.实验分为4组,每组3只,A组用生理盐水瘤内注射;B组用顺铂(20mg/L)瘤内注射;C组用HIF-1α siRNA(20 μmol/L)瘤内注射;D组用HIF-1α siRNA(20 μmol/L)和顺铂(20 mg/L)协同瘤内注射.各组注射体积均为20 μl,每周测量肿瘤体积变化.3周后处死裸鼠,测量各组移植瘤质量;RT-PCR半定量检测各组移植瘤TE-1细胞HIF-1α mRNA的表达;免疫组织化学法检测其HIF-1α蛋白的表达;流式细胞仪AnnexinV-FITC/PI双标检测其细胞的凋亡.结果 抑瘤实验开始3周后,A、B、C和D组的移植瘤体积分别为(1.477±0.132)cm~3、(1.200±0.114)cm~3、(1.223±0.129)cm~3 和(0.890±0.141)cm~3;移植瘤质量分别为(7.38±0.96)g、(6.35±0.73)g、(6.12±0.65)g和(3.51±0.42)g.B、C、D 3组的抑瘤率分别为14.0%、17.1%、52.4%,其中D组移植瘤的生长受抑制最明显,与其他3组比较差异有统计学意义(P<0.05).C和D组TE-1细胞的HIF-1α mRNA表达下调至0.343±0.080和0.312±0.055,蛋白表达下调至0.196±0.018和0.229±0.035,与A(mRNA 1.315±0.179,蛋白0.523±0.102)、B(mRNA 1.483±0.460,蛋白0.542±0.174)两组差异有统计学意义(P<0.01),而C、D两组间差异无统计学意义(P>0.05).A、B、C和D组的TE-1细胞凋亡率分别为(6.13±1.38)%、(28.30±4.82)%、(34.10+5.56)%、(52.88±8.77)%,其中D组与其他3组比较,差异有统计学意义(P<0.01).结论 HIF-1α siRNA能有效下调裸鼠体内食管鳞癌TE-1细胞HIF-1α的表达,提高顺铂的细胞毒性作用,诱导细胞凋亡,显著抑制移植瘤的生长.

• 单位
  中山大学附属第三医院