长链非编码RNA HGBC在乳腺癌中的表达及其对肿瘤细胞恶性生物学行为的影响

作者：于洋; 申鹏; 闫园; 于博凡; 赵培; 秦涛^*; 尤伟^*

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(09): 1680-1683.

• 乳腺癌
• 长链非编码RNA
• 微小RNA
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的检测长链非编码RNA HGBC(Lnc HGBC)在乳腺癌中的表达并观察LncHGBC对乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭影响。方法利用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测LncHGBC在人乳腺癌细胞系(MDA-MB-231:5.323±2.330, MCF7:2.963±1.304, T47D:4.017±1.750, BT549:2.670±1.170)及正常乳腺细胞MCF10A(1.247±0.576)中的表达差异。应用小干扰技术(si-RNA)敲低LncHGBC的表达量, 并利用EDU实验(阴性对照组比敲低组为48.330±6.236比20.330±3.682, t=5.468, P<0.05), 平板克隆实验(阴性对照组比敲低组为68.330±8.498比39.670±4.110, t=4.295, P<0.01)、细胞计数试剂盒(CCK-8)实验(阴性对照组比敲低组为0.900±0.081比0.576±0.057, t=3.894, P<0.01)、Transwell实验(阴性对照组比敲低组为71.667±8.498比45.000±4.082, t=4.000, P<0.05)检测LncHGBC敲低后对MDA-MB-231增殖、迁移及侵袭能力的影响。借助双荧光素酶实验探索LncHGBC调控miR-618分子机制。两组之间的比较采用独立样本t检验, 临床数据分析采用χ2检验或费舍尔精确数据检验。结果 RT-PCR检测出乳腺癌细胞(MDA-MB-231、MCF7、T47D、BT549)中LncHGBC的相对表达水平分别为5.323±2.330、2.963±1.304、4.017±1.750, 2.670±1.170, 显著高于正常乳腺细胞MCF10A(1.247±0.576), 差异有统计学意义(P<0.05)。EDU实验结果显示, 敲低LncHGBC后, EDU阳性细胞比例明显低于阴性对照组(20.330±3.682比48.330±6.236, t=5.468, P<0.05)。平板克隆实验显示, 敲低LncHGBC后, 细胞集落的数量明显低于阴性对照组(39.670±4.110比68.330±8.498, t=4.295, P<0.01)。CCK-8实验显示, 敲低LncHGBC组细胞增殖能力明显低于阴性对照组(0.576±0.057比0.900±0.081, t=3.894, P<0.01)。Transwell实验显示敲低LncHGBC组细胞穿膜数量明显低于阴性对照组(45.000±4.082比71.667±8.498, t=4.000, P<0.05)。侵袭实验显示敲低LncHGBC组细胞穿膜数目低于对照组(21.333±4.189比43.666±4.497, t=5.139, P<0.05)。RT-PCR结果显示敲低LncHGBC, 能够上调miR-618表达(2.500±0.408比1.000±0.122, t=4.977, P<0.01)。双荧光素酶实验显示, LncHGBC可以结合miR-618抑制miR-618的表达(2.500±0.408比1.000±0.122, t=4.977, P<0.01)。结论 LncHGBC在乳腺癌中表达量增高, 并通过降低miR-618来促进乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

• 单位
  郑州大学; 河南省人民医院