东方巴贝虫cDNA文库的构建与免疫学筛选

作者：刘琴; 周丹娜; 周艳琴; 张颖; 贺兰; 姚宝安; 赵俊龙

来源：中国寄生虫学与寄生虫病杂志, 2009, (03): 210-214.

• 东方巴贝虫
• cDNA文库
• 免疫学筛选
• 序列分析 Babesia orientalis
• cDNA library
• Immunoscreening
• Sequence analysis

目的构建东方巴贝虫(Babesia orientalis)cDNA文库,从中筛选免疫学阳性的克隆。方法用东方巴贝虫感染牛,提纯红细胞内虫体的总RNA,反转录合成cDNA,PCR扩增后将其连接于噬菌体载体(λTriplEx2),通过体外包装,建成东方巴贝虫cDNA文库,并进行扩增。用兔抗东方巴贝虫的血清筛选cDNA文库,阳性克隆经大肠埃希菌BM25.8自身环化酶将噬菌体重组子λTriplEx2转化为相应的质粒重组子pTriplEx2,PCR鉴定插入片段大小,并测序,用Blast对测序结果进行同源性分析,并对序列编码的氨基酸序列进行结构和功能的预测。结果未扩增文库的滴度为2.0×106pfu/ml...

• 单位
  中国疾病预防控制中心寄生虫病预防控制所; 血吸虫病和丝虫病合作中心; 农业微生物学国家重点实验室; 世界卫生组织; 华中农业大学