CD133免疫磁珠分选脐血内皮祖细胞的培养及鉴定

作者：张军霞; 李瑞; 赵鹏; 石磊; 程子昊; 尤永平; 傅震

来源：中国肿瘤生物治疗杂志, 2008, 15(02): 159-162.

DOI：10.3872/j.issn.1007-385X.2008.02.013

• 内皮祖细胞
• CD133
• 免疫磁珠分选
• 增殖
• 血管生成
• 迁移

目的:建立具备高效增殖、血管生成与迁移能力的脐血内皮祖细胞(endothelial progenitor cell,EPC)分离培养鉴定方法。方法:应用免疫磁珠分选纯化脐血单个核细胞中的CD133+细胞,体外EGM-2MV培养液培养扩增,通过形态学、细胞表面标志及细胞功能鉴定EPCs,并与脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)作比较。结果:EPCs分离培养7d左右开始出现小集落,21d左右集落扩大、相互融合,并呈现出典型铺路石样改变;培养14d左右,约90%的细胞免疫荧光Dil-ac-LDL和FITC-UEA-1双阳性,阳性率达90%。CD133和CD34阳性率从86.04%降至2.96%、90.88%降至2.99%,而CD31阳性率从1.12%升至99.88%。在增殖、血管生成与迁移能力上比较,EPCs明显优于HUVECs(P<0.05)。结论:通过CD133免疫磁珠分选脐血单个核细胞,可培养出具有高效增殖、血管生成与迁移能力的EPCs。

• 单位
  南京医科大学第一附属医院