巨噬细胞ABCG1介导的氧化固醇外流的研究

作者:刘平原; 沈思琪; 武燕翔; 陈连凤; 严晓伟*
来源:中国心血管杂志, 2021, 26(01): 49-52.
DOI:10.3969/j.issn.1007-5410.2021.01.012

摘要

目的测定巨噬细胞ABCG1介导的氧化固醇外流情况。方法利用ABCG1基因小干扰RNA慢病毒表达载体感染THP-1细胞,经有限稀释法筛选出敲低单克隆稳转株;用PMA诱导/ml)刺激24h后,通过液相色谱串联质谱测定细胞氧化固醇7β-羟基胆固醇(7β-OHC)和7-酮基胆固醇(7-KC)外流情况。结果对待测样品进行了氧化固醇定性与定量分析,发现与无外流接受体的空白对照组相比,诱导氧化型胆固醇外流率增加(7-KC:28.6%±2.3%比4.1%±0.7%,P<0.001;7β-OHC:35.5%±5.7%比3.7%±1.1%,P<0.001)。与阴性对照组相比,ABCG1敲低组氧化型胆固醇的外流率降低(7-KC:16.1%±3.1%比24.7%±2.3%,P<0.05;7β-OHC:15.7%±0.7%比33.1%±3.7%,P<0.001)。胞内氧化固醇沉积量通过细胞总蛋白进行校正,结/mg比(2.13±0.08)μg/mg,P<0.05;7β-OHC:(1.61±0.51)μg/mg比(0.65±0.20)μg/mg,P<0.05]。结论巨噬细胞ABCG1低表达可抑制氧化固醇7β-OHC及7-KC外流,增加胞内氧化固醇沉积。

  • 单位
    北京协和医院; 中国医学科学院北京协和医学院

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