摘要

背景:人骨髓间充质干细胞在体外培养传代过程中存在着细胞老化现象,但其机制尚不明确。乙醛脱氢酶3B1具有抗氧化应激的作用,且氧化应激是导致细胞衰老的重要因素之一。乙醛脱氢酶3B1的表达异常是否与人骨髓间充质干细胞衰老相关尚未见报道。目的:观察乙醛脱氢酶3B1在人骨髓间充质干细胞衰老过程的表达变化,为探讨干细胞的衰老机制提出新研究方向。方法:建立人骨髓间充质干细胞自然衰老模型并进行鉴定,Bisulfit甲基化检测衰老前后的乙醛脱氢酶3B1基因表达变化,采用RT-qPCR、免疫荧光和Western blot检测乙醛脱氢酶3B1的mRNA和蛋白表达变化。结果与结论:(1)人骨髓间充质干细胞传代扩增培养,β-半乳糖苷酶染色显示阳性细胞不断增多,传至第7-13代时,阳性细胞最为明显;(2)甲基化测序显示第16代人骨髓间充质干细胞中乙醛脱氢酶3B1的表达下调;(3)在人骨髓间充质干细胞体外传代过程中乙醛脱氢酶3B1的mRNA和蛋白表达均下调;(4)结果表明,乙醛脱氢酶3B1在人骨髓间充质干细胞自然衰老中表达下调,但其作用机制还需进一步研究。