摘要
目的研究细胞周期监测点激酶1(CHK1)通过Ras同源基因家族蛋白A(Rho A)/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶(ROCK)信号通路对宫颈癌细胞放疗敏感性的影响及机制。方法取宫颈癌HeLa细胞随机分为A组(不做处理)、B组(HeLa细胞经8 Gy照射处理)、C组(转染si-CHK1至HeLa细胞)、D组(转染si-CHK1至HeLa细胞+8 Gy照射处理)、E组(转染si-CHK1至HeLa细胞+RhoA信号通路激活剂+8 Gy照射处理)。RT-qPCR检测细胞CHK1 mRNA相对表达量,MTT实验检测细胞增殖能力,平板克隆形成实验检测放疗敏感性,流式细胞术检测细胞周期分布、细胞凋亡,Western blot检测CHK1、RhoA、ROCK蛋白相对表达量。结果与A组比较,B组、C组、D组、E组CHK1 mRNA相对表达量、MTT实验A值、细胞克隆形成率降低,且D组<B组<C组、E组(P<0.05)。与A组比较,B组、C组、D组及E组G1期、S期细胞分布比例增加,G2/M期细胞分布比例减少,且G1期、S期细胞分布比例D组>B组>C组、E组(P<0.05),G2/M期细胞分布比例D组<B组<C组、E组(P<0.05)。与A组比较,B组、C组、D组、E组细胞凋亡率增加,CHK1、RhoA、ROCK蛋白相对表达量降低,且细胞凋亡率,D组>B组>C组、E组,CHK1、RhoA、ROCK蛋白相对表达量,D组<B组<C组、E组(P<0.05)。结论 CHK1低表达可增强宫颈癌细胞的放疗敏感性,可能是通过抑制RhoA/ROCK信号通路相关蛋白表达发挥作用。
-
单位郑州大学第二附属医院