摘要
目的 探讨A型肉毒毒素(botulinum toxin, BTX-A)对miR-21/Smad7治疗兔耳增生性瘢痕的效果。方法 自2019年6月至2019年12月,北部战区总医院烧伤整形科将15只兔随机分成3组,分别为对照组、模型组、BTX-A组(治疗组),对照组不做任何处理,10只兔造模型后,模型组注射生理盐水0.02 ml,BTX-A组注射BTX-A 2 U,HE染色检测组织形态。实时荧光定量PCR检测miR-21和Smad7的表达情况,对miR-21和Smad7的表达进行相关性分析。取人成纤维细胞分成Smad7+miR-21对照组、Smad7+miR-21模拟物组、Smad7突变体+miR-21对照组、Smad7突变体+miR-21模拟物组,转染后48 h采用荧光素酶报告基因实验检测Smad7的活性。取人成纤维细胞,分为miR-21对照组、miR-21对照+BTX-A组、miR-21模拟物组、miR-21抑制物组和miR-21模拟物+BTX-A组,处理后24 h,实时荧光定量PCR检测miR-21及Smad7表达情况。结果 与对照组相比,模型组中可见细胞排列被过度增生性胶原破坏,BTX-A组中可观察到纤维结缔组织增生的程度明显有所缓解。模型组miR-21表达含量显著高于对照组和BTX-A组(P<0.05),Smad7表达含量显著低于对照组和BTX-A组(P<0.05),miR-21和Smad7的表达呈负相关。转染后48 h,Smad7+miR-21模拟物组Smad7的活性低于Smad7+miR-21对照组;Smad7突变体+miR-21模拟物组与Smad7突变体+miR-21对照组相近。实时荧光定量PCR结果显示,作用24 h后,与miR-21对照组和miR-21模拟物+BTX-A组相比,miR-21模拟物组miR-21含量上调,Smad7含量下调(P<0.05);与miR-21对照+BTX-A组相比,miR-21对照组的miR-21含量较多,Smad7含量较少(P<0.05)。结论 BTX-A能够通过下调miR-21进而促进Smad7的表达,发挥治疗HS的作用。