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摘要
为探究鸡核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3 (NLRC3)的分子特征以及在健康鸡和副鸡禽杆菌(APG)感染鸡中的表达情况，本研究经PCR扩增鸡NLRC3基因，测序后与其他物种的该基因进行相似性分析，构建鸡NLRC3基因进化树，分析其遗传进化关系；通过各种生物信息学软件，分析鸡NLRC3的理化性质、结构域、二级结构和三级结构等。结果显示，鸡NLRC3基因编码区为3 282 bp，编码1 092个氨基酸；鸡NLRC3与鸿雁等鸟类亲缘关系较近，在进化树中处于同一分支；结构域分析显示，鸡NLRC3由N端的CARD结构域、中央的NBD结构域和C端的14个LRR结构域组成，其二级结构有526个α-螺旋、43个β-转角、66个延伸链、290个无规则卷曲，而其三级结构呈马蹄形。本研究进一步通过荧光定量PCR检测鸡NLRC3基因在健康鸡组织中的分布，随后将APG分别感染鸡及DF-1细胞，通过荧光定量PCR检测鸡NLRC3的转录水平分析鸡NLRC3分子表达特征。结果显示，鸡NLRC3在健康鸡的23个被检组织中广泛分布，其中在空肠中的转录水平最高；APG感染鸡及DF-1细胞后，脾脏、眶下窦和DF-1细胞中NLRC3的转录水平先下调，随后显著上调。上述结果首次表明NLRC3参与鸡抗APG感染的先天免疫应答及免疫调节。本研究为进一步研究鸡NLRC3在抗细菌感染免疫应答机制中的作用奠定了基础。
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