地高辛标记的大鼠NGF RNA探针的制备和应用

作者：沈宓; 丁斐

来源：神经解剖学杂志, 2005, (04): 435-438.

• 神经生长因子(NGF)
• 地高辛标记NGF
• RNA探针
• 原位杂交
• 大鼠 nerve growth factor(NGF)
• NGF RNA probe labeled with digoxingenin
• in situ hybridization
• rat

制备用地高辛标记的神经生长因子(NGF)的RNA探针并用其研究NGF在海马组织中的表达。设计NGF引物,构建NGF/pGEMT重组质粒,分别用ApaⅠ和SacⅠ进行酶切得到线性化DNA片段,以Sp6和T7聚合酶转录合成酶合成地高辛标记的(dig)正、反义RNA探针。运用点膜杂交的方法检测探针的敏感度;运用该探针的原位杂交法分析NGF在海马中的表达。本研究成功地构建了NGF/pGEMT质粒,获得了正、反义digNGFRNA探针,并应用该探针在海马中观察到NGFmRNA的表达。本研究的结果为深入探讨NGF在海马发育和损伤过程中的表达奠定了基础。

• 单位
  南通大学