TNFAIP1基因过表达载体的构建及其慢病毒包装

作者：丰昀; 彭文婷; 黄凤鑫; 周芸羽; 蒋乐龙; 张敏; 王光伟^*

来源：中国医师杂志, 2018, 20(07): 986-989.

• 肿瘤坏死因子α诱导蛋白1/遗传学
• 基因表达
• 遗传载体

目的构建肿瘤坏死因子α诱导蛋白1(TNFAIP1)基因过表达慢病毒载体并检测其体外表达水平。方法通过PCR扩增TNFAIP1的序列,双酶切线性化pEZ-Lv105载体后与TNFAIP1片段连接,转化至大肠杆菌stbl3中进行筛选,并进行TNFAIP1-Lv105阳性克隆的测序和鉴定。将TNFAIP1-Lv105与HIV包装质粒混合物共转染于293T细胞,收集上清并浓缩,获得慢病毒浓缩液。结果测序结果与设计序列一致,测定病毒浓缩液滴度为2×108 TU/ml。结论成功构建过表达TNFAIP1的慢病毒载体,为研究TNFAIP1在视神经胶质瘤中的作用提供了分子工具。

• 单位
  湖南医药学院; 长沙市中心医院