摘要
目的:研究鞘氨醇激酶1(Sphk1)抑制剂PF543对宫颈癌SiHa细胞凋亡和增殖的影响。方法:体外培养SiHa细胞,并分为SiHa、SiHa+20μmol/L PF543和SiHa+40μmol/L PF543三组,分别采用流式细胞实验检测细胞凋亡和细胞周期情况,CCK-8实验和Edu实验检测细胞增殖能力,RT-PCR和Western Blot实验检测各组Sphk1、Caspase3、Bax、Bcl-2、Ki67和Cyclin D1的表达情况。结果:与SiHa组相比,20和40μmol/L PF543组均可增加Bax和cleaved-Caspase3表达,抑制Sphk1、Bcl-2、Cyclin D1和Ki67的表达,具有剂量依赖性(P<0.05),而总Caspase3蛋白表达无明显变化;同时,20和40μmol/L PF543组细胞活率逐渐下降,显微镜下红色荧光占比逐渐减少(P<0.05)。流式细胞实验中,随着PF543浓度的增加,细胞凋亡率逐渐升高,G1期细胞占比逐渐增加,S期占比逐渐减少(P<0.05)。结论:PF543下调Sphk1后促进SiHa细胞凋亡、阻滞细胞于G1期和抑制细胞增殖。这可能与增加促凋亡基因cleaved-Caspase3和Bax表达,抑制抗凋亡基因Bcl-2和促增殖基因Ki67、Cyclin D1表达有关。
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单位武汉大学中南医院