摘要
目的:探讨p16基因高表达对293细胞衰老的影响。方法:实验设正常组、空质粒组和高表达组。RTPCR扩增人p16基因,构建p16基因高表达载体,利用脂质体将其转染293细胞。采用CCK-8法和流式细胞术检测p16基因高表达对293细胞增殖和细胞周期的影响,β-半乳糖苷酶染色法检测细胞衰老状态,RT-PCR和Western blot法检测p16、p21 mRNA和蛋白的表达。结果:p16基因高表达可抑制293细胞的增殖,并将细胞阻滞在G0/G1期(F=158.057,P<0.001);高表达组细胞p16和p21在mRNA和蛋白水平的表达明显增加(F=73.467、54.988、9.923、44.060,P均<0.05),β-半乳糖苷酶阳性细胞率明显增加(F=137.266,P<0.001)。结论:p16基因高表达可抑制293细胞的增殖,将细胞阻滞在G0/G1期,提高细胞中p16和p21的表达,促进细胞衰老。
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