西地那非通过AKT/GSK3β信号通路保护小鼠肾纤维化的作用机制

作者：许春花; 王永双; 金福; 金美花

来源：医学研究生学报, 2020, 33(06): 592-597.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2020.06.007

• 肾纤维化
• Akt
• GSK-3β
• 西地那非
• 小鼠

目的肾纤维化是慢性肾病持续进展的基本病理过程,探讨西地那非(Sil)对小鼠肾纤维化的保护作用,为临床应用Sil治疗肾纤维化提供实验依据。方法 90只昆明小鼠随机随机表法分为假手术组(n=30),小鼠仅做输尿管分离,不结扎及剪断输尿管,1 mL/(10 g·d)给予0.9%NaCl溶液皮下注射;UUO模型组(n=30),小鼠分离及结扎输尿管制备UUO模型,1 mL/(10 g·d)给予0.9%NaCl溶液皮下注射;UUO+Sil给药组(n=30),小鼠于UUO模型成功后第1天开始每天同一时间皮下注射西地那非[12 mg/(kg·d)],共注射14 d。实验第3、7、14天每组随机选择10只,取眼球血测定血清肌酐和尿素氮;取左侧肾组织行HE和Masson染色,观察肾组织的病理改变;采用蛋白免疫印迹法检测肾组织中Akt和GSK-3β蛋白及其磷酸化水平。结果 UUO 3 d后,UUO组小鼠血清肌酐、尿素氮含量[(63.10±2.90)μmol/L、(12.87±0.40)mmol/L]较假手术组[(26.00±3.70)μmol/L、(8.07±0.60)mmol/L]显著升高(P<0.05),7 d血清肌酐、尿素氮含量[(64.39±2.50)μmol/L、(13.59±0.30)mmol/L]较假手术组[(29.18±3.50)μmol/L、(9.14±0.50)mmol/L]升高(P<0.05),14 d血清肌酐、尿素氮含量[(64.39±2.50)μmol/L、(15.03±0.50)mmol/L]亦明显较假手术组[(29.74±2.50)μmol/L、(9.90±0.20)mmol/L]高(P<0.05)。给药组小鼠3、7、14 d肌酐[(58.59±3.50)、(50.13±2.20)、(46.13±3.30)μmol/L]较UUO组[(63.10±2.90)、(64.39±2.50)、(64.58±1.80)μmol/L]降低(P<0.05)。给药组小鼠3、7、14 d尿素氮[(10.54±0.70)、(10.53±0.90)、(10.25±0.40)μmol/L]较UUO组[(12.87±0.40)、(13.59±0.30)、(15.03±0.50)μmol/L]降低(P<0.05)。与假手术组比较,UUO组p-Akt/Akt、p-GSK-3β/GSK-3β在中表达水平明显降低(P<0.05),与UUO组比较,给药组中p-Akt/Akt、p-GSK-3β/GSK-3β蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。UUO 7 d时肾小管上皮细胞萎缩,管腔扩张,间质增宽及较多炎性细胞浸润。UUO 14 d时上述改变更明显,间质成纤维细胞增生和间质纤维化,给药组相比较UUO模型组上述病理改变减轻。UUO模型组随时间的延长胶原纤维逐渐增多, UUO 14 d时,间质中胶原纤维明显增多,小管上皮受损,细胞红染变淡。给药组较UUO模型组上述表现较轻。结论西地那非能减轻肾纤维化引起的肾功能损伤。Sil对UUO模型肾纤维化有抑制作用,其机制可能与上调Akt/GSK3β的通路相关。

• 单位
  延边大学附属医院