快速检测伪狂犬病毒荧光定量PCR技术建立及应用

作者：万超; 温国元; 潘兹书; 张楚瑜; 熊中良; 杨峻; 艾地云

来源：Virologica Sinica, 2006, (05): 485-489.

• 伪狂犬病毒
• 荧光定量PCR
• 定量检测 Pseudorabies virus (PRV)
• Fluorescent quantitative PCR
• Quantitative detection

以伪狂犬病毒(PRV)保守的gE基因序列为参考,设计、优化出一对特异的PCR引物和一条TaqMan荧光探针,结合RotorGene检测系统,建立一种快速定量检测伪狂犬病毒的荧光定量PCR技术。该方法线形范围为1.0×102-1.0×107拷贝/μL,灵敏度达102拷贝/μLDNA,比常规PCR高10倍。检测的特异性明显高于常规PCR,同时避免了常规PCR因电泳造成的污染。应用该技术检测66例猪组织或鼻咽拭子样品,阳性42份,阳性检出率为63.6%(42/66)。与病毒分离培养、常规PCR相比较结果显示,该方法具有快速、灵敏、特异、重复性好和能定量检测等优点,该方法可用于猪场PRV感染的快速定量...

• 单位
  武汉大学; 病毒学国家重点实验室; 生命科学学院; 湖北省农业科学院畜牧兽医研究所