中华猕猴桃华优遗传转化系统建立研究

作者:陆荣生; 杜晓莉; 霍秀娟; 韩美丽; 马跃峰; 覃建林; 郭成林
来源:广东农业科学, 2014, 41(07): 38-2.
DOI:10.16768/j.issn.1004-874x.2014.07.030

摘要

为了更好的利用遗传转化技术进行猕猴桃品种改良研究,以中华猕猴桃华优组培苗幼嫩叶片为材料,研究了外植体分化不定芽再生途径所需的培养条件及转化效率提高方法。结果表明,在叶片不定芽诱导培养基中加入浓度为0.751.0 mg/L的TDZ时,叶片愈伤发生率达85.7%90.1%,不定芽发生率达41.8%44.6%;在TDZ 1.0mg/L基础上,补充0.10.4 mg/L IAA可使叶片愈伤发生率提高到96.7%100%,不定芽发生率提高到67.4%71.9%;在农杆菌侵染液与共培养基中同时加入75100μmol/L浓度的AS,可使GUS瞬时表达率及卡那抗性芽发生率分别提高至27.9%、14.5%;外植体被农杆菌侵染前,的预培养23 d有利于提高GUS表达率与卡那抗性芽发生率。GUS染色与PCR扩增检测结果显示,Shiva A基因已转化至中华猕猴桃华优转基因植株。

全文