噬菌体展示技术在HBV前-S1蛋白反式激活基因1启动子DNA的结合蛋白筛选中的应用

作者：纪冬; 成军; 韩萍; 邵清; 陈国凤

来源：中华实验和临床感染病杂志(电子版), 2012, (04): 263-267.

• 肝炎病毒
• 乙型
• 前-S1蛋白
• 转录启动子
• DNA结合蛋白质类 Hepatitis B virus
• Pre-S1 protein
• Transcription initiation site
• DNA-binding proteins

目的应用噬菌体展示技术筛选HBV前-S1蛋白反式激活基因1(PS1TP1)的启动子DNA结合蛋白,进一步阐述PS1TP1在慢性乙型肝炎发病机制中的作用。方法根据GenBank中的PS1TP1启动子DNA序列设计引物,运用PCR技术以人基因组DNA为模板,扩增获得PS1TP1启动子的DNA片段,并通过亚克隆方法构建真核报告载体pCAT3-PS1TP1p后转染HepG2细胞系,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测转染细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性,以验证所获得的DNA片段具有启动子活性;将PS1TP1启动子DNA片段进行固相化,对噬菌体人肝细胞cDNA文库进行筛选,将所获得的噬斑裂解...

• 单位
  解放军第302医院; 首都医科大学附属北京地坛医院