鸡滑液囊支原体和鸡毒支原体双重荧光定量PCR检测方法的建立

作者：贺生芳; 姜肖军; 陈林军; 郝俊虎^*

来源：中国口岸科学技术, 2023, 5(12): 86-91.

• 鸡滑液囊支原体
• 鸡毒支原体
• Taq Man-MGB双重荧光定量PCR

本研究根据鸡滑液囊支原体(Mycoplasma synoviae,MS)vhlA基因序列和鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)PvpA基因序列，分别设计特异性引物和Taq Man-MGB探针，通过条件优化，建立能够同时检测MS和MG的双重荧光定量PCR方法。检测结果表明，所建立的方法与其他禽类常见病原无交叉反应，方法特异性好；以含有MS vhlA基因和MG PvpA基因的重组质粒为模板绘制标准曲线，其相关系数(R2)分别为0.996和0.995，线性关系良好，建立的方法组内和组间变异系数均<2%；对MS、MG最低检测值均为10 copies/μL，所建立的方法对临床样本检测结果与世界动物卫生组织(WOAH)采用的双重荧光定量检测方法结果一致。研究表明，所建立的Taq Man-MGB双重荧光定量PCR方法特异性强，灵敏度高，可用于临床样品的快速检测。