溶血磷脂酸受体6在蕈样肉芽肿向大细胞转变中的意义及其对皮肤T细胞淋巴瘤细胞增殖和凋亡的影响

作者：林羽洁; 刘凤洁; 高玉梅; 刘向君; 许卜方; 李映依; 赖盼; 陈卓婧; 孙婧茹; 涂平; 汪旸^*

来源：中华皮肤科杂志, 2022, 55(02): 102-109.

• 淋巴瘤, T细胞, 皮肤
• 蕈样真菌病
• 受体, 溶血磷脂酸
• 细胞凋亡
• 不良预后
• 大细胞转变

目的探讨皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)蕈样肉芽肿(MF)患者中溶血磷脂酸受体6(LPAR6)的表达水平及其对CTCL疾病发展及预后的影响与可能机制。方法收集北京大学第一医院皮肤性病科2011—2020年间确诊的110例MF患者, 包括49例发现队列的24例大细胞转变(LCT)及25例非大细胞转变(NLCT), 61例验证队列的24例LCT及37例NLCT。提取患者组织总RNA分别采用RNA测序及RT-PCR检测LPAR6的表达, 比较LPAR6在LCT与NLCT患者间的表达差异及对生存预后的影响。构建2种CTCL细胞系MyLa、Sz4过表达LPAR6细胞模型, 以正常表达细胞为对照, 检测过表达LPAR6对MyLa、Sz4细胞增殖活力的影响;通过加入LPAR6相关配体溶血磷脂酸(LPA)、2S-OMPT、三磷酸腺苷(ATP)、腺苷(ADO), 采用细胞增殖实验检测试剂盒及流式细胞仪检测激活LPAR6对过表达LPAR6 MyLa、Sz4细胞增殖活力与凋亡的影响。采用log-rank检验进行预后分析, 两组间数据的比较采用t检验或Mann-WhitneyU检验。结果 RNA测序结果显示, 发现队列中LPAR6是LCT中显著性低表达的基因之一;验证队列中, LCT组的LPAR6表达水平[M(Q1, Q3)为204.90(81.90, 512.70)]低于NLCT组[809.40(417.50, 1 829.20), U = 242.00, P = 0.002];两队列中, 低表达LPAR6均与不良预后的发生风险显著相关(P < 0.01)。细胞增殖实验结果显示, 在实验的0、24、48、72 h, 过表达组MyLa、Sz4细胞与对照组细胞的细胞增殖活力差异均无统计学意义(均P > 0.05);分别采用LPA、2S-OMPT、ATP、ADO激活MyLa细胞LPAR6后48 h, 过表达组MyLa细胞的增殖活力(1.38 ± 0.01、1.04 ± 0.01、1.09 ± 0.03、1.23 ± 0.01)均低于对照组(1.73 ± 0.04、1.23 ± 0.01、1.24 ± 0.01、1.42 ± 0.03, t值分别为30.33、18.38、4.78、5.75, 均P < 0.05), 细胞凋亡率(17.93% ± 0.88%、17.75% ± 0.35%、23.97% ± 0.57%、31.44% ± 0.34%)均高于对照组(3.98% ± 0.03%、7.81% ± 0.59%、11.95% ± 0.85%、12.02% ± 0.48%, t值分别为15.93、14.49、11.74、33.01, 均P < 0.05);分别采用2S-OMPT、ADO激活Sz4细胞LPAR6后48 h, Sz4细胞增殖活力2S-OMPT对照组为1.48 ± 0.01、过表达组为1.29 ± 0.04;ADO对照组为1.51 ± 0.02、过表达组为1.27 ± 0.01, 过表达组均低于对照组(P < 0.05), 细胞凋亡率均高于对照组(2S-OMPT对照组29.35% ± 0.55%、过表达组41.70% ± 0.70%;ADO对照组24.60% ± 1.00%、过表达组37.05% ± 0.15%, 均P < 0.05)。结论 LPAR6在LCT患者中低表达并与不良预后的发生风险显著相关, 体外激活LPAR6能够抑制CTCL细胞的增殖, 促进细胞凋亡, LCT患者LPAR6表达水平降低可能是疾病进展的重要机制之一。

• 单位
  北京大学第一医院