镰形扇头蜱肌钙蛋白Ⅰ基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达

作者：马腾; 周金林; 周勇志; 向飞宇; 柴国祚; 沈杰

来源：中国兽医寄生虫病, 2007, (03): 7-11.

• 镰形扇头蜱
• 肌钙蛋白Ⅰ
• 克隆
• 表达 Rhipicephalus haemaphysaloides
• troponin Ⅰ
• cloning
• expression

目的克隆镰形扇头蜱肌钙蛋白Ⅰ(TnI)的cDNA并进行表达及鉴定。方法用RT-PCR方法从镰形扇头蜱总RNA中克隆编码肌钙蛋白Ⅰ的cDNA片段,将该cDNA连接到pET-32a(+)表达载体,并转入宿主菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并对表达产物进行Western blot分析。结果获得镰形扇头蜱的eDNA,并在大肠杆菌中以包含体的形式高效表达,Westem blot分析表明,抗TnI重组蛋白兔血清可以识别蜱体内的TnI,并在22 kDa和36 kDa之间有两条带。结论蜱体内可能同时存在两个大小不等的TnI,为进一步的研究打下基础。

• 单位
  农业部; 中国农业科学院上海兽医研究所