摘要
目的研究柑橘黄酮对1-甲基-4-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导的SH-SY5Y细胞增殖和凋亡及作用机制。方法 SH-SY5Y细胞分为对照组(细胞正常培养24 h)、MPP+组(2.5 mmol·L-1的MPP+诱导细胞24 h)、不同浓度CF组(2.5 mmol·L-1的MPP+分别与3.125,6.25,12.5,25μmol·L-1的柑橘黄酮共同作用24 h)、si-SNHG1组(2.5 mmol·L-1的MPP+诱导转染SNHG1小干扰RNA的细胞24 h)、si-NC组(2.5 mmol·L-1的MPP+诱导转染乱序无意义序列的细胞24 h)、25μmol·L-1 CF+pcDNA3.1-SNHG1组(2.5 mmol·L-1的MPP+与25μmol·L-1的柑橘黄酮共同作用转染SNHG1过表达载体的细胞24 h)和25μmol·L-1CF+pcDNA3.1组(2.5 mmol·L-1的MPP+与25μmol·L-1的柑橘黄酮共同作用转染空载体的细胞24 h)。以噻唑蓝法检测各组细胞增殖,以流式细胞仪检测细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应检测SNHG1表达水平,以蛋白质印迹检测细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、P21蛋白(P21)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和B淋巴细胞瘤-2相关蛋白(Bax)表达水平。结果 MPP+组、对照组48 h OD值分别为0.41±0.04,1.31±0.13,凋亡率分别为(29.53±2.87)%,(8.66±0.87)%,差异有统计学意义(P<0.05);si-SNHG1组、si-NC组、25μmol·L-1CF+pcDNA3.1-SNHG1组、CF 25μmol·L-1+pcDNA3.1组48 h OD值分别为1.15±0.12,0.40±0.04,0.57±0.06,1.05±0.10,凋亡率分别为(10.26±1.11)%,(30.08±3.07)%,(24.62±2.53)%,(13.56±1.44)%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。各组Cyclin D1、Bcl-2、P21、Bax比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论柑橘黄酮可促进MPP+诱导的SH-SY5Y细胞增殖,并抑制其凋亡,作用机制与下调SNHG1表达有关。
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单位神经内科; 南华大学附属第二医院