miR-29a-3p靶向 SGMS2调控PCOS卵巢颗粒细胞慢性炎症的机制研究

作者：徐芳; 李晓珂; 潘紫萌; 梁锦玲; 马明; 匡洪影; 孙淼^*

来源：中华生殖与避孕杂志, 2023, 43(10).

• 多囊卵巢综合征
• miR-29a-3p
• 神经鞘磷脂合成酶2
• 卵巢颗粒细胞
• 炎症

目的探究miR-29a-3p/SGMS2轴对人类卵巢颗粒样肿瘤细胞系(human ovarian granulosa-like tumor cell line, KGN)炎症反应的调控机制。方法通过构建并验证过表达和敲低miR-29a-3p及SGMS2转染KGN细胞模型, 双荧光素酶报告基因实验检测 miR-29a-3p与SGMS2的结合;MTT法检测各组细胞的增殖;免疫荧光法观察增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen, PCNA)和Ki67蛋白荧光强度;流式细胞术检测细胞凋亡;酶联免疫吸附法检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α, TNF-α)、白介素(interleukin, IL)-6、IL-1β和鞘磷脂的表达;Western blotting检测细胞中Caspase-3、cleaved-Caspase-3、SGMS2和p-p65蛋白表达。结果 miR-29a-3p与SGMS2之间存在位点结合, 且能够负向调控SGMS2的表达水平。KGN细胞中过表达SGMS2能够增高其吸光度值(P=0.007), 并增强其PCNA和Ki67蛋白的免疫荧光强度(均P<0.001);过表达SGMS2能够降低KGN细胞的凋亡率(P=0.001), 升高炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β和鞘磷脂的表达水平(均P<0.001)。过表达SGMS2时KGN细胞中cleaved-Caspase-3、p-p65和SGMS2蛋白表达量升高(P=0.001, P<0.001, P<0.001)。而敲低SGMS2时, 以上结果具有与过表达SGMS2相反的变化趋势。结论 miR-29a-3p与SGMS2之间存在靶向负向调节关系, SGMS2能够促进KGN细胞的炎症反应, 可为多囊卵巢综合征等妇科内分泌疾病的治疗提供靶点。

• 单位
  黑龙江中医药大学; 北京中医医院; 第一临床医学院