环孢霉素A对葡萄糖氧化酶诱导的HepG2线粒体功能损伤和细胞凋亡的保护作用

作者：于卫华; 刘江正; 王钊; 刘颖; 海春旭

来源：癌变.畸变.突变, 2014, 26(01): 10-15.

• 葡萄糖氧化酶
• 环孢霉素A
• 急性肝损伤
• 线粒体膜电位
• 能量供应

目的:探讨环孢霉素A(CsA)对葡萄糖氧化酶(GOX)诱导的肝细胞线粒体功能损伤和细胞凋亡的影响。方法:胞分别给予不同浓度的GOX和CsA处理,MTT法检测细胞活力,确定所要选用的剂量和时间点。以10μmol/L的CsA预处理2 h,并给予25 U/L GOX处理12 h作为CsA+GOX组,同时设立空白对照组、GOX阳性对照组、CsA阴性对照组。分别采用Annexin V/PI双染色结合流式细胞术检测细胞凋亡率;GENMED活体细胞线粒体膜通道孔荧光试剂盒检测线粒体膜通透性转换;JC-1染色激光共聚焦检测线粒体膜电位变化;ATP检测试剂盒检测细胞内ATP水平;液相氧电极法检测线粒体耗氧量。结果:MTT结果显示GOX能诱导HepG2细胞活力下降,且呈现时间和剂量效应关系(P均<0.05);与空白对照组比较,25 U/L GOX作用12 h可诱导HepG2细胞凋亡,同时伴有线粒体膜通道开放和膜电位下降,细胞内ATP水平和线粒体耗氧量下降(P均<0.05),而10μmol/L的CsA预处理2 h有一定的保护作用,可以有效阻断线粒体结构功能的损伤,降低凋亡率,CsA+GOX组与GOX阳性对照组比较差异均具有统计学意义(P均<0.05)。结论:CsA对氧化应激诱导的肝细胞线粒体功能损伤和凋亡具有保护作用。

• 单位
  第四军医大学