红三叶AFLP体系的建立及优化

作者：蒲小剑; 田久胜; 田新会; 杜文华

来源：草原与草坪, 2018, 38(02): 89-96.

DOI：10.13817/j.cnki.cyycp.2018.02.014

• 红三叶
• AFLP分子标记
• 体系优化

采用正交设计和单因素试验相结合的方法,以红三叶(Trifolium pratense)高感白粉病品种岷山红三叶与抗白粉病新品系(甘农PR1)杂交产生F1代作为试验材料,对红三叶AFLP反应中7个因素(DNA浓度,酶切时间,两酶(EcoRI,MseI)浓度,预扩增产物稀释倍数,2×PCR Master Mix用量,引物组合)进行优化试验。建立了适合红三叶稳定且多态性高的最佳AFLP反应体系:90ng/μL DNA模板、5h酶切、8UEcoRI、6UMseI、30倍稀释预扩增产物、10μL 2×PCR Master Mix。优化的AFLP反应体系在红三叶的验证中表现出良好的稳定性和重复性,为进一步进行红三叶种质鉴定、遗传图谱构建、基因定位和遗传多样性的分析奠定了技术基础。

• 单位
  甘肃农业大学; 草地农业生态系统国家重点实验室