非洲猪瘟病毒LFD-RPA快速检测方法的建立

作者：林彦星; 吴江; 赵现锋; 史卫军; 刘建利; 曹琛福; 曾少灵; 阮周曦; 花群义^*

来源：中国兽医科学, 2020, 50(08): 952-956.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0144

• 非洲猪瘟病毒
• 重组酶聚合酶扩增
• 侧流层析试纸条
• 快速检测

本研究根据非洲猪瘟病毒(ASFV)B646L基因保守序列设计nfo RPA特异性引物和探针,建立了ASFV核酸LFD-RPA快速检测法。结果表明,该方法特异性强,与猪圆环病毒2型(PCV2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪A型塞内卡病毒(SVA)等病原核酸无交叉反应;最低可以检测到1.57×102copies/μL重组质粒pUC-B646L;检测时间短,其中RPA扩增20 min,LFD检测10～20 min。应用该法及OIE推荐的荧光PCR法对24个模拟样品进行检测,检测结果一致。对50份已知的临床样品核酸进行检测,阳性符合率为73.3%。上述结果表明,本研究建立的LFD-RPA快速检测方法操作简便,为ASFV现场快速检测提供了技术支持。

• 单位
  深圳海关动植物检验检疫技术中心