新城疫病毒mRNA疫苗的构建及鉴定

作者:崔苗苗; 陈凯楠; 李金斗; 丁佳欣; 陈铭桦; 冯嘉轩; 周铁忠; 舒秀伟; 刘晓雷; 丁壮*
来源:中国兽医学报, 2023, 43(12): 2480-2485.
DOI:10.16303/j.cnki.1005-4545.2023.12.12

摘要

信使RNA(messenger RNA,mRNA)的核酸疫苗是近年来兴起的一种新型疫苗技术。新城疫病毒(Newcastle disease virus, NDV)的血凝素-神经氨酸酶(HN)是NDV的主要保护性抗原,可诱导机体产生中和抗体,是新城疫(Newcastle disease, ND)新型疫苗研发的重要靶点。本研究将NDV HN基因连接到含有T7启动子的载体中,并在其5′UTR和3′UTR分别引入人-β球蛋白的非编码区域以增强转录的mRNA稳定性,经质粒线性化、体外转录、cap加帽处理、mRNA纯化制备NDV HN-mRNA,将其转染至HEK-293T细胞中验证NDV HN-mRNA的表达效果,Western blot和免疫荧光试验结果表明构建mRNA候选疫苗可在HEK-293T细胞中高效表达抗原蛋白,为ND新型疫苗的研发提供新的思路。

全文