人AP2β基因慢病毒表达载体的构建及其对肝癌HepG2细胞生长的影响

作者：霍楠; 马路园; 朱祥; 丛瑞; 初众; 唐枝; 亢小峰; 赵彩彦^*; 徐小洁^*

来源：军事医学, 2020, 44(02): 105-109.

• AP2β基因
• 慢病毒属
• 载体
• 肝肿瘤
• HepG2细胞

目的构建人AP2β基因慢病毒(lentivirus)表达载体,并检测其过表达对肝癌细胞HepG2生长的影响。方法从人乳腺文库中采用PCR技术扩增出人AP2β基因编码序列,并将其插入pCDH载体,获得pCDH-AP2β真核表达载体;将其与包装载体转染293T,包装成Lenti-AP2β慢病毒并测定病毒滴度,感染肝癌HepG2细胞,Western印迹检测病毒载体介导的AP2β蛋白的表达情况,并进行生长曲线实验研究过量表达AP2β对HepG2细胞生长的影响。结果双酶切和Western印迹表明,pCDH-AP2β真核表达质粒构建成功,包装成滴度为2.5×107PFU/ml的LentiAP2β慢病毒载体;将此慢病毒载体感染HepG2细胞,Western印迹显示,慢病毒载体成功表达AP2β,生长曲线和克隆形成实验结果表明,AP2β过表达可抑制肝癌细胞HepG2的生长。结论构建了AP2β的慢病毒表达载体LentiAP2β,在HepG2细胞中过量表达AP2β可抑制细胞的生长,该实验为进一步研究AP2β在肝癌中的功能奠定了基础。

• 单位
  河北医科大学第三医院